培养基的配制过程
培养基的配制过程如下:
1、选择培养基,根据所需培养的微生物种类、生长条件等特性,选择适合的培养基。
2、准备试剂和仪器,制备培养基需要一些试剂和仪器,如称量器、搅拌器、pH计等。
3、配制用水,可用蒸馏水、去离子水等,电阻率不小于30万Ωcm,每批应检查一次。
4、自行配制的培养基,各营养成分应按要求顺序加入,避免产生沉淀。
5、称量好的干粉培养基应先溶解再高压灭菌。自行配制的培养基应完全溶解后再调PH。
6、需要加热煮沸的培养基应避免溢出,应边搅拌边加热,烧糊的培养基其成分已改变,不得使用,应重配。
7、配制好的培养基一般采用高压灭菌,且应立即灭菌,以防微生物生长消耗养分而改变培养基成分。
8、灭菌后的培养基应迅速冷却到所须温度,避免长时间保存在灭菌锅中,造成过度灭菌,影响培养基的营养成分或选择性效果。
三种最常用的培养基:
1、MEM细胞培养基。又称低限量Eagle培养基,在Eagle的基础培养基(BME)上修改而来,删去赖氨酸、生物素,氨基酸浓度增加,适合多种细胞单层生长,有可高压灭菌品种,是一种最基本、试用范围最广的培养基。
2、DMEM细胞培养基。分为低糖和高糖两种。低糖适用于依赖性贴壁细胞培养,特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。
3、RPMI-1640细胞培养基。适合悬浮细胞培养,也可用于贴壁细胞培养。
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