高效液相色谱的正相与反相怎么区分？

楼主的意思是看流动相和固定相的类型来区分正相还是反相么\x0d\\x0d\正相反相取决于固定相的极性高于流动相是正相反之则反\x0d\\x0d\流动相极性大于固定相，称之为反相\x0d\\x0d\流动相极性小于固定相，称之为正相\x0d\\x0d\看色谱柱的固定相填料是什么\x0d\\x0d\正相色谱法采用极性固定相（如聚乙二醇、氨基与腈基键合相）；流动相为相对非极性的疏水性溶剂（烷烃类如正已烷、环已烷），常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和极性较强的化合物（如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等）。\x0d\反相色谱法一般用非极性固定相（如C18、C8）；流动相为水或缓冲液，常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。适用于分离非极性和极性较弱的化合物。RPC在现代液相色谱中应用最为广泛，据统计，它占整个HPLC应用的80%左右。\x0d\\x0d\根据流动相固定相之间的极性大小来区分的\(^o^)/~\x0d\\x0d\流动相极性大于固定相，称之为反相\x0d\\x0d\流动相极性小于固定相，称之为正相\x0d\\x0d\建议您可以到行业内专业的网站进行交流学习！\x0d\\x0d\在此，我推荐您分析测试百科网！我和我身边很多人也都是在这个网站学习很成长起来的！

反相色谱与正相色谱的差异

本质上是填料(固定相)的不同,正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强；反相色谱柱填料极性弱，洗脱顺序由强到弱。以下是详细说明：

1、正相色谱

正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica）以及其他具有极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。

由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或其他极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如正已烷（Hexane），氯仿（Chloroform），二氯甲烷（Methylene

Chloride）等。

2、反向色谱

反向色谱用的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。

常用的反向填料有：C18（ODS）、C8（MOS）、C4（Butyl）、C6H5（Phenyl）等。

在液-固吸附色谱,，液-液分配色谱这两种液相色谱中才涉及到正相色谱及反相色谱。液-固吸附色谱（固定相是固体吸附剂，它是根据物质在固定相是吸附作用差异来分离的。吸附作用越强，K值越大，保留时间越长）液-液分配色谱（是将固定液涂在担体上作为固定相的，它的分离原理与液液萃取的原理相同，从而服从分配定律。在固定液中溶解度大，K值大，保留时间长）。

正相色谱是指流动相的极性小于固定相的极性；反正色谱是指流动相的极性大于固定相的极性。

对于反相色谱，极性越小的物质，流动相的极性越大，保留时间越长。极性越小的物质，流动相的极性越小，保留时间越短。对于极性大的物质来说，流动相的极性对其保留时间影响较小。而正相色谱正好相反。

因此在应用上正相色谱用于分离极性较大的物质，如蛋白质、生物碱等。反相色谱多用于分离极性较小的物质，在流动相的选择上，反相色谱的优势更大，在实际工作中反相色谱的应用更为广泛

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