咽拭实验结果与报告的菌落特征

咽喉中存在的细菌较多,可以有厌氧及需氧性链球菌、葡萄球菌、肺炎球菌、四联球菌、脑膜炎球菌、卡他球菌、喉杆菌、结核杆菌、枯草杆菌、百日咳杆菌、肺炎杆菌及铜绿假单胞菌等。此外,也可有白色念珠菌、奋森螺旋体等。本检查以咽拭子作为标本,通过咽拭标本进行病原体培养的检查方法。主要用于检查小儿常见细菌、衣原体、支原体、口腔毛滴虫、真菌等。咽拭子培养主要用于上呼吸道感染的诊断和治疗。咽拭子培养报告结果受多种因素影响,比较复杂。

1.目的 从咽部和扁桃体取分泌物做细菌培养或病毒分离,以协助诊断。

2.用物 无菌咽拭子培养管,酒精灯,火柴,无菌生理盐水,压舌板。

3.操作方法 备齐用物,贴好标签,向患者说明目的及配合方法,以取得合作。点燃酒精灯,将拭子取出蘸无菌生理盐水(必要时以压舌板轻压舌部),嘱患者发“啊”音使之口张大,以轻快的动作,迅速擦拭两侧腭弓及咽、扁桃体的分泌物后,迅速将试管口在酒精灯火焰上消毒,将拭子插入试管中塞紧,并立即送验。送检后进行接种,种于培养基上,放入培养箱。

4.注意事项 咽拭子培养时,应在清晨先用淡盐水(约1%)漱口后,方可采样留取标本,这样可以将口腔中杂菌清理掉,以便准确地查出上呼吸道及下呼吸道的感染细菌。

5.其他 如在痰及咽拭子分泌物中检测出致病菌,则视为呼吸道感染。可结合其他检查(X线透视、B超等)诊断呼吸道感染部位。呼吸道感染常见细菌有:葡萄球菌属、肺炎双球菌、流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌、葡萄球菌、链球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌等。如培养出结核分枝杆菌,则为肺结核。如培养出类酵母菌则考虑是否在感染期间使用抗生素不当或过量,应当立即停止使用抗生素,改用抗真菌药物,如两性霉素B、灰黄霉素、克霉唑等。

6.可根据下述特点进行鉴别

(1)在菌落周围产生2~4mm宽、界线分明、完全透明的溶血环、涂片为革兰阳性球菌并呈链状排列,可能是乙型溶血性链球菌。

(2)菌落细小、半透明、有草绿色溶血环、涂片为革兰阳性球菌呈链状排列,可能为甲型溶血性链球菌。需要进一步与肺炎球菌区别时,可做胆汁溶菌试验及菊糖发酵反应。

(3)菌落细小半透明、不溶血、涂片为革兰阳性链状排列的球菌时,为丙型链球菌。

(4)菌落扁平边缘隆起、中央稍凹、半透明、呈草绿色溶血、革兰染色为阳性双球菌、呈矛头状排列时为肺炎球菌,应以胆汁溶菌及菊糖发酵反应与甲型溶血性链球菌区分。

(5)菌落中等大小、表面光滑、呈灰色、革兰染色为阴性双球菌,呈肾形排列时,可能为脑膜炎球菌,需要进一步做氧化酶试验及糖发酵试验(接种于含血清之葡、麦、蔗糖发酵管中)。

(一)衣原体肺炎

鼻咽拭子涂片做姬姆萨染色可见病原体呈碘染的胞质内包涵体;采用细胞培养做病原体分离;双份血清检查抗体或做抗原检测可以帮助诊断;或用单克隆抗体通过直接荧光染色或ELISA检测抗原做快速诊断。

(二)真菌性肺炎

1.念珠菌性肺炎

(1)真菌检查:咽拭、痰液、粪便、病灶组织或假膜、渗液等均可。

(2)直接涂片镜检:将上述标本少许置于玻片上,加1滴10%氢氧化钾,放上盖玻片后轻微加热,然后镜检,可见假菌丝及孢子。由于健康人可以带菌,均须多次镜检阳性或在该菌平时不寄生的部分取到标本,镜检阳性者才有诊断意义。

(3)真菌培养:可同时将以上标本接种于常用的真菌培养基(沙氏培养基)。多在3~4d出现乳白色光滑的菌落,如该菌落数50%即有诊断意义。

2.肺曲霉菌病

(1)直接涂片检查:由患处所得的标本,做直接涂片,镜检可见菌丝或曲霉菌孢子。

(2)培养:取痰、血、局部受损的组织等均可做曲霉菌培养。曲霉菌是实验室中常见的污染菌,故只有反复培养出同一曲霉菌并结合临床表现,方有诊断价值。

(三)毛细支气管炎

鼻咽拭子细菌培养与健康儿无明显不同(二者均可有带菌情况)。

除朊病毒外的所有生物都含有核酸，核酸包括脱氧核糖核酸（DNA)和核糖核酸（RNA)。新型冠状病毒是一种只含有核糖核酸的病毒。在新冠病毒出现后，我国科学家在短时间内完成了对新冠病毒的全基因组序列的分析。在核酸检测过程中，如果在患者样本中发现新型冠状病毒特殊的核酸序列，则说明该患者可能感染新型冠状病毒。

在临床核酸检测中，首先需要根据试剂盒的样本要求进行样本的收集。样本类型主要包括咽拭子，鼻拭子，痰液，支气管灌洗液，肺泡灌洗液等。

获得样本后，要立即进行检验，如果不能立即检验样本要根据试剂盒说明书进行低温保存运输，运送到专门的机构进行核酸检测。在运输过程中一定要防止样品混淆，交叉感染，这样会导致检测结果不准确，出现假阳性等情况。

RNA的检测首先要将其转录为cDNA，在进行扩增检测。通过荧光定量PCR所得到样本Ct值的大小，就可以判断样本中是否含有核酸。

无论是样本的提取，保存，运输，样本核酸的提取检测以及结果的判读必须严格按照试剂盒的说明书来进行。

考虑到利于操作等多种因素，核酸检测样本多为鼻拭子。鼻拭子和口咽拭子的提取方法如下：

用一根较长的棉签插入鼻孔，通过鼻腔取鼻咽后部的分泌物；口咽拭子则是从口腔进入，擦拭扁桃体和咽隐窝附近的分泌物。

核酸检测全程时间比较短，无创口，高效快速。检测完就可以离开，回去等待结果就好。考虑到新型冠状病毒 感染症状的特殊性，有条件以及所处地区有要求的人要积极配合完成核酸检测。

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