wb洗膜用tbs和tbst的区别
wb洗膜和tbst都是在western中用作洗膜的缓冲液,PSBT是磷酸盐缓冲液,TBST是Tris-Hcl缓冲液。wb洗膜和tbst差别主要在于PBST中由PBS加入了Tween20,Tween20是非离子型去污剂。
因为western中所用的膜可以与蛋白质结合,这样的话孵育过程中,抗体是能够与膜非特异性结合的,为了防止以后曝光造成胶片背景太高,在孵育抗体后,混有Tween2的PBS能够将非特异性结合的抗体洗掉,增加特异性。
在抗体的保存中,抗体往往是以极高浓度保存在甘油之中的,使用的时候按照一定的比例去稀释,TBST跟TBS都可以用来稀释抗体,以做孵育抗体之用,PBST跟PBS不清楚,有人用PBS稀释的,PBST没见过有人用过,其实按照道理来说是可以使用的。
westernblot的实验注意问题:
蛋白样品的提取及蛋白含量的检测,蛋白样品的提取咱们完全是按照试剂盒说明书来做的,步骤没有什么讲的,但是因为蛋白样品的好坏直接决定了是否能做出来蛋白条带,这就好比盖房子所需要的砖头一样,一定要务必认真。
TCT与LCT区别为:采用技术不同、检测率不同、满意度不同。
一、采用技术不同
1、TCT:TCT采用液基薄层细胞检测系统检测宫颈细胞并进行细胞学分类诊断。
2、LCT:LCT采用宫颈刮片巴氏涂片检查宫颈细胞并进行细胞学分类诊断。
二、检测率不同
1、TCT:TCT测试模糊子宫颈细胞样本的数量,可以明显提高癌变细胞的检测率。
2、LCT:LCT由于血液、粘液、炎症等因素影响,常使样本模糊,存在检测误差。
三、满意度不同
1、TCT:TCT减少需要重复做巴氏测试的次数,从而降低了患者因被重做测试而引起的不必要的担心。满意度比LCT更高。
2、LCT:LCT需要重复做巴氏测试的次数较多,从而增加了患者因被重做测试而引起的不必要的担心。满意度比TCT更低。
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