SDS电泳胶片分析蛋白质各个亚基没跑开是什么原因

一楼说的是一个可能原因，就是各亚基分子量太过接近。

如果各亚基的差别足够大，用SDS电泳分离是可行的，则我有如下建议改进实验条件：

我假定楼主的目标条带是胶上部五分之一到四分之一处的三细三粗条带。则此蛋白看起来分子量很大。建议楼主降低胶的浓度，延长电泳时间，让目标蛋白可以跑下来。

楼主的样本看起来是较纯的蛋白质，小分子量的部分如果不需要完全可以让它们跑出去，即不必要在溴酚兰到底时就停止电泳。

现在已经知道目标蛋白和marker条带之间的关系，完全可以靠marker准确估计目标蛋白的位置。最好电泳至目标蛋白进入到胶的下半部，这样达到最大分离效果。前提是胶的浓度适合，否则再怎么跑下来也分离不开。粗略地讲，100-200kd的蛋白可以使用5-10%acrylamide。

电泳是什么意思？

1、工作原理不同

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳或称为活性电泳是在不加入SDS和巯基乙醇等变性剂的条件下，对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，常用于酶的鉴定、同工酶分析和提纯。

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是根据寡核苷酸的大小来分离，因此可将全长产物与不完整的短分子分开。

2、功能不同

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可以使生物大分子在电泳过程中保持其天然的形状和电荷，它们的分离是依据其电泳迁移率的不同和凝胶的分子筛作用，因而可以得到较高的分辨率。

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的蛋白质或多肽与SDS结合，经热变性和二硫键的还原，形成所带负电荷相对一致的非折叠衍生物，其泳动速度主要由分子量决定。

3、特点不同

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的过程中，蛋白质的迁移率不仅和蛋白质的等电点有关，还和蛋白质的分子量以及分子形状有关，其中蛋白质的等电点是最重要的影响因子，要根据蛋白质的等电点来选择对应的电泳缓冲系统。

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳电泳时通常每一泳道至少加1mg合成的寡核苷酸，电泳后在紫外灯下定位寡核苷酸条带，将长度正确的寡核苷酸从凝胶上切下。

百度百科-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳

百度百科-非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳

带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动，称为电泳。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。

在确定的条件下，带电粒子在单位电场强度作用下，单位时间内移动的距离（即迁移率）为常数，是该带电粒子的物化特征性常数。

不同带电粒子因所带电荷不同，或虽所带电荷相同但荷质比不同，在同一电场中电泳，经一定时间后，由于移动距离不同而相互分离。分开的距离与外加电场的电压与电泳时间成正比。

扩展资料：

电泳是电泳涂料在阴阳两极，施加于电压作用下，带电荷的涂料离子移动到阴极，并与阴极表面所产生的碱性物质作用形成不溶解物，沉积于工件表面。在外加直流电源的作用下，胶体微粒在分散介质里向阴极或阳极作定向移动，这种现象叫做电泳。利用电泳现象使物质分离，这种技术也叫做电泳。

胶体有电泳现象，证明胶体的微粒带有电荷。各种胶体微粒的本质不同，它们吸附的离子不同，所以带有不同的电荷。

在一定的支持物上，于均一的载体电解质中，将样品加在中部位置，在电场作用下，样品中带正或负电荷的离子分别向负或正极以不同速度移动，分离成一个个彼此隔开的区带。区带电泳按支持物的物理性状不同，又可分为纸和其他纤维膜电泳、粉末电泳、凝胶电泳与丝线电泳。

百度百科——电泳

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