如何判别花粉质量的优劣？

国家规定蜂花粉分3个等级，分等质量指标见表7。

表7 蜂花粉分等质量指标

表7 蜂花粉分等质量指标（续）-1

注：碎团粒指标指基层收购时的限量。

检验方法分为感官检验和理化检验两个方面。

（1）感官检验

用目测或放大镜观察、鼻嗅、口尝、根据花粉的颜色、状态、气味、滋味进行判断。

①杂质测定

收购时，目测无明显杂质，将手插入蜂花粉包装袋内，弯回手指慢慢从包内提出，指上无砂粒、细土，即表明较纯净。或精确称取蜂花粉样品约100克，放入搪瓷盘内，拣出杂质称定，用下列公式计算杂质：

杂质=杂质重量（克）/样品重量（克）×100%

②单一花粉团率测定

也称计数法，即随机从蜂花粉包装内取出蜂花粉团数克，用手数出100粒，拣出其中本蜜源植物的蜂花粉团粒，用下列公式计算：

单一花粉团率=拣出本蜜源植物蜂花粉团数（粒）/数出蜂花粉团总数（粒）×100%

不易根据色泽区分蜂花粉团粒品种时，可用显微镜检验区别。

③水分测定

也称烘箱干燥法。精密称取蜂花粉样品约10克，置于已干燥至恒重的培养皿或铝制浅盘中，样品厚度约为5毫米，放入电热鼓风干燥箱内，在105℃下干燥2～4小时后取出，置于干燥器，冷却至室温后称重。在同一温度下重复干燥1小时左右，直至恒重（两次重量差不超过2毫克）。按下列公式计算：

水分=B-C/B-A×100%

式中A为培养皿重量（克），B为样品与培养皿重量（克），C为B达到恒重时的重量（克）。平行试验结果允许误差为±0.4%。

④碎团粒测定

称取蜂花粉样品约50克，用20目分样筛筛出碎粒及粉末并称重，用下列公式计算：

碎团粒=筛出碎团粒重量（克）/蜂花粉样品重量（克）×100%

⑤蛋白质测定

采用凯氏定氮法，平行实验结果允许误差为±0.6%。

试剂：

浓硫酸（分析纯）

硫酸铜硫酸钾混合试剂：称取含5个结晶水的硫酸铜3克，硫酸钾9克，置研钵中混合均匀，研细。

田氏混合指示剂：吸取0.1%次甲基蓝乙醇溶液50毫升和0.1%甲基红乙醇溶液200毫升混合摇匀，贮存于棕色瓶中。

2%硼酸溶液：称取硼酸2克，加蒸馏水约50～60毫升使之溶解并稀释至100毫升，摇匀，然后滴加田氏混合指示剂，振摇至溶液呈紫红色。

0.1摩尔/升盐酸标准溶液：量取浓盐酸9毫升加蒸馏水稀释至1000毫升摇匀。

标定：精确称取270～300℃干燥至恒重的基准无水碳酸钠0.15克，置于150毫升锥形瓶中，加蒸馏水50毫升使其溶解，滴入田氏混合指示液2滴，用上述盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为紫红色为终点，用下列公式计算盐酸的摩尔浓度（M）：

M=W/V×0.106

式中 V——盐酸溶液消耗的体积（毫升）；

W——无水碳酸钠的重量（克）。

将0.1摩尔/升盐酸溶液用蒸馏水稀释10倍，即为0.01摩尔/升盐酸标准溶液（用前配制）。

40%氢氧化钠溶液。

仪器及装置：万分之一天平、消化管、容量瓶、锥形瓶、移液管、25毫升滴定管、量筒、凯氏定氮半微量蒸馏装置一套、调温式远红外消煮用电炉。

测定步骤：

消化：精确称取已研细、混匀的蜂花粉样品约50～60毫克，置于消化管中，加入300克硫酸钾、硫酸铜混合试剂和3毫升浓硫酸，将消化管插入调温式远红外消煮电炉孔中，接通电源，在通风橱中消化，待消化液呈清澈的亮绿色时消化即告完毕（消化时间约1小时）

蒸馏：消化液冷却后，将其定量转移到蒸馏器中，并用少量蒸馏水冲洗消化管数次，冲洗液并入蒸馏器中。向蒸馏器中加入11～12毫升40%氢氧化钠溶液后，加入5毫升蒸馏水（一半流入蒸馏器，一半在玻璃杯中作水封），用调温电炉开始蒸馏，用盛有10毫升2%硼酸溶液的锥形瓶吸收蒸馏放出的氮，待锥形瓶内溶液的颜色由紫红色变为绿色时，继续蒸馏2～3分钟，停止蒸馏。

滴定：用0.01摩尔/升盐酸标准溶液滴定锥形瓶中吸收的氨量，滴定至溶液由绿色变为淡紫红色为终点，用下列公式计算：

蛋白质（%）=（VA-VB）×M×0.014×6.25/W×100

式中 VA——滴定样品消耗的盐酸标准溶液毫升数；VB——滴定空白消耗的盐酸标准溶液毫升数；

M——盐酸标准溶液的摩尔浓度；

W——称出样品的克数；

0.014——1毫克氮的克数；

6.25——氮转换为蛋白质的系数。

⑥维生素C测定：

采用2，6-二氯酚靛酚钠盐滴定法，平行试验结果的允许误差为0.3毫克/100克。

试剂：

2%草酸溶液。

标准维生素C溶液：精密称取维生素C（分析纯）约20毫克，置于100毫升容量瓶中，用2%草酸溶液稀释至刻度，摇匀（临用前配制）。

2，6-二氯酚靛酚钠溶液：称取2，6-二氯酚靛酚钠（分析纯）约50毫克，溶于50毫升热蒸馏水中，冷却后定量移入250毫升容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，贮存于棕色瓶中，置冰箱中保存。

标定：精确吸取标准维生素C溶液2毫升，加2%草酸溶液5毫升，用2，6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至桃红色，在15秒钟不褪色为终点，根据已知标准维生素C溶液和2，6-二氯酚靛酚钠溶液用量，按下列公式计算1毫升2，6-二氯酚靛酚钠溶液相当于维生素C毫克数：

W=A×2/V

式中 W——1毫升2，6-二氯酚靛酚钠溶液相当于维生素C毫克数；

A——1毫升维生素C标准溶液所含维生素C毫克数；

V——滴定2毫升维生素C标准溶液所消耗2，6-二氯酚靛酚钠溶液毫升数。

15%亚铁氰化钾溶液。

30%醋酸锌溶液。

仪器：减压抽滤装置一套、托盘扭力天平及常用玻璃器皿等。

测定步骤：

样品配制：精确称取蜂花粉样品约10克，置于研钵中，加少许2%草酸溶液研细，定量移入100毫升容量瓶中，力口2%草酸溶液稀释至刻度，加入15%亚铁氰化钾溶液数毫升，然后加30%醋酸锌溶液数毫升（以溶液不沉淀为止），过滤备用。

滴定：精确吸取样液10毫升，置于锥形瓶中，用2，6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至呈桃红色，在15秒钟不褪色为终点，记下2，6-二氯酚靛酚钠溶液的毫升数，用下列公式计算：

W=（V-V1）×N/B×b/a×100

式中 W——100克蜂花粉团样品中含维生素c毫克数；

V1——滴定空白所消耗的2，6-二氯酚靛酚钠溶液的毫升数；

N——1毫升2，6-二氯酚靛酚钠溶液相当的维生素C毫克数；

B——滴定所取样品溶液的毫升数；

a——样品的克数；

b——样品溶液的总毫升数。

⑦灰分测定：

仪器：万分之一分析天平、高温炉、坩埚。

测定步骤：精确称取蜂花粉样品约10克，放入已恒重的坩锅中，在105℃烘箱中干燥至近恒重，在300℃下灼烧至完全炭化，移入高温炉中，在600℃灼烧至完全灰化，冷却至200℃以下后放入干燥器内，冷却至室温精确称重，直至恒重。用下列公式计算结果：

灰分（%）=W2-W3/W1-W3×100

式中 W1——坩埚和样品的重量（克）；

W2——坩埚和灰分的重量（克）；

W3——灼烧至恒重的坩埚重量（克）。

平行试验允许误差为±0.3%。

⑧过氧化氢酶测定——气量法：

仪器：Xu-Hu型气量法蜂花粉活性检测仪。

试剂：

3%过氧化氢溶液：取30%的过氧化氢溶液稀释10倍。

测定步骤：

把洁净水倒入水浴槽至产气管架处，接通电源，调节控温器使指示灯亮度达到最大。当水温升到38℃时，调节控温器使指示灯熄灭，待水温恒定在37℃并保持5分钟后再用。

精确称取蜂花粉样品约0.5克置于小烧杯中，加入1毫升蒸馏水，用圆头玻璃棒把蜂花粉团碾成均匀的蜂花粉水悬液。

用带三通阀门的5毫升产气管，吸取全部蜂花粉水悬液，排除空气，关闭阀门，放入37℃水浴槽中10分钟（简称A管）。

用另一产气管吸取3%过氧化氢溶液5毫升，排除空气，关闭阀门，放入37℃水浴槽中10分钟（简称B管）。

10分钟后，将A、B两管从水浴槽中取出，打开B管阀门，排除空气，将A管与B管接口联好，然后从B管给A管中注入1毫升过氧化氢溶液，关上阀门，把A管放入37℃水浴槽中，同时计时，记录2分钟后的产气量（毫升），并按下式计算过氧化氢酶单位：

过氧化氢酶单位=1268×V

式中 1268——37℃下1毫升氧气的重量（微克）；

V——37℃下1克蜂花粉1分钟内所产生的氧气体积（毫升）。

平行试验结果的允许误差为50过氧化氢酶单位。

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