体内dna复制和体外pcr扩增有相同点和区别点吗?
一、相同点
1、体内DNA复制和体外PCR扩增DNA都是DNA的复制过程。
2、体内DNA复制和体外PCR扩增DNA都需要酶促合合成过程。
二、不同点
1、条件不同
体内DNA复制:以DNA双链、细胞分裂环境为条件。
体外PCR扩增DNA:以模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件。
2、过程不同
体内DNA复制:是DNA双链在细胞分裂以前的分裂间期S期进行复制,包括引发、延伸、终止的过程。
体外PCR扩增DNA:是将待扩增的DNA片段与其两侧互补的寡核苷酸链引物经高温变性、低温退火、引物延伸等多次循环过程。
3、作用不同
体内DNA复制:体内DNA复制主要用于生物遗传的基础。
体外PCR扩增DNA:用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病的诊断或任何有DNA,RNA的地方。
百度百科-DNA复制
? 百度百科-PCR扩增
一、定义不同:
PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。
测序引物分自带引物和通用引物,自带引物为客户自行设计的PCR扩增引物或者载体及目的片段上设计的引物进行测序。
二、作用不同:
通用引物一般在购买载体时公司提供,一般测序引物如T7、SP6、M13等测序公司免费使用。
不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病的诊断或任何有DNA,RNA的地方。PCR又称无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术。
三、适用不同:
PCR引物又称为寡核苷酸引物,也就是RNA,是由人工合成的,分为两种,引物1和引物2。由于DNA聚合酶只能从核苷酸链的5'端到3'端进行复制,也就是只能识别3'的尾端。
测序必须为特异性引物,不能为随机、兼并、不纯、带荧光标记、长度过长引物.测序引物长度一般要求在18-25BP,最长不超过30BP..PCR引物要求相对低一些.简单说来就是PCR引物可以用来扩增但是不一定适合测序。
扩展资料:
PCR引物设计的目的是找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列。如前述,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。对引物的设计不可能有一种包罗万象的规则确保PCR的成功,但遵循某些原则,则有助于引物的设计。
引物序列在模板内应当没有相似性较高,尤其是3’端相似性较高的序列,否则容易导致错误引发(False priming)。降低引物与模板相似性的一种方法是,引物中四种碱基的分布最好是随机的,不要有聚嘌呤或聚嘧啶的存在。尤其3′端不应超过3个连续的G或C,因为这样会使引物在GC富集序列区错误引发。
百度百科-引物
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