蛋白质用什么试剂检测？ 谢谢！

蛋白质用双缩脲试剂检测。

双缩脲试剂是一个用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。它是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由0.1g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制。会遇到蛋白质显紫色。

双缩脲试剂本是用来检测双缩脲，由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时（多肽），试液中的铜与多肽配位，络合物呈紫色。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。

双缩脲试剂中真正起作用的是硫酸铜，而氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境，因此它可被其他碱，如氢氧化钠所代替。向试剂中加入碘化钾，会延长试剂的使用寿命。酒石酸钾钠的作用是保护反应生成的络离子不被析出变为沉淀,从而使试剂失效。

扩展资料

注意事项

在使用双缩脲试剂时候，必须注意，必须是先加0.1 g/mL氢氧化钠溶液，再加0.01 g/mL硫酸铜的水溶液。若先加入硫酸铜溶液，再加入氢氧化钠溶液，则无法充分制造碱性环境，此时CuSO4会与NaOH发生复分解反应，生成蓝色氢氧化铜沉淀，导致现象不清，无法较好地达到实验目的。

配置方法

双缩脲试剂A是质量分数为0.1 g/mL的NaOH水溶液；

双缩脲试剂B是质量分数为0.01 g/mL的CuSO4水溶液。

先在待测液中加入双缩脲试剂A 3mL，振荡均匀（营造碱性环境），再加入1～2滴双缩脲试剂B，振荡均匀。如果待测液里含有蛋白质，那么会看到溶液变成紫色。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。

蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫色的络合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。

百度百科-双缩脲试剂

1、作用不同

斐林试剂是新配制的溶液，它在加热条件下与醛基反应，被还原成砖红色的沉淀，可用于鉴定可溶性还原糖的存在。

鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂，发生的是双缩脲反应。双缩脲反应实质是在碱性环境下的与双缩脲试剂发生的紫色反应。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生颜色反应。

2、使用方法不同

斐林试剂是在甲、乙两液等量混合后立即使用，而使用双缩脲试剂时应先加入A液1mL，摇匀，再加入B液4滴，摇匀，再观察实验现象。

3、组成成分不同

斐林试剂和双缩脲试剂虽然都由NaOH和CuS04两种成分配制而成，但是用量上还是有所不同。斐林试剂分为甲液和乙液两种，其中甲液为0.1g/mL的NaOH溶液，乙液为0?05g/mL的CuS04溶液。双缩脲试剂分为A液和B液，其中A液为0.1g/mL的NaOH溶液，B液为0.01g/mL的CuS04溶液。

注意事项：

在使用双缩脲试剂时候，必须注意，必须是先加0.1 g/mL氢氧化钠溶液，再加0.01 g/mL硫酸铜的水溶液。若先加入硫酸铜［CuSO4]溶液，再加入氢氧化钠［NaOH]溶液，则无法充分制造碱性环境，此时CuSO4会与NaOH发生复分解反应，生成蓝色氢氧化铜［Cu(OH)2]沉淀，导致现象不清，无法较好地达到实验目的。

以上内容参考?百度百科—双缩脲试剂、百度百科—双缩脲

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