HPLC的常用术语解释

　高效液相色谱法(HighPerformanceLiquidChromatography\HPLC)又称?高压液相色谱?、?高速液相色谱?、?高分离度液相色谱?、?近代柱色谱?等。它是在生化和分析化学中常用的柱层析仪。接下来我为大家整理了HPLC的常用术语解释，希望对你有帮助哦!

　第一部分　色谱曲线

　1、色谱图(chromatogram)：色谱柱流出物通过检测器系统时所产生的响应信号对时间或流动相流出体积的曲线图，或者通过适当的 方法 观察到的纸色谱或薄层色谱斑点、谱带的分布图。

　2、(色谱)峰(chromatographic peak)：色谱柱流出

　3、峰底(peak base)：峰的起点与终点之间的连接的直线

　4、峰高(h ，peak height)：色谱峰最大值点到峰底的距离(图1 中的BE)。

　5、峰宽(W ，peak width)：在峰两侧拐点(图1 中的F ，G)处所作切线与峰底相交两点的距离

　6、半高峰宽(W h/2 ，peak withd at half height)：通过峰高的中点作平行于峰底的直线，此直线与峰两侧相交两点之间的距离(图1 中的HJ)。

　7、峰面积(A ，peak area)：峰与峰底之间的面积

　8、拖尾峰(tailing peak)：后沿较前沿平缓的不对称的峰。

　9、前伸峰(leading peak)：前沿较后沿平缓的不对称的峰。(又叫伸舌峰、前延峰)

　10、假峰(ghost peak)：除组分正常产生的色谱峰外，由于仪器条件的变化等原因而在谱图上出现的色谱峰，即并非由试样所产生的峰。这种色谱峰并不代表具体某一组分，容易给定性、定量带来误差。(又叫鬼峰)

　11、畸峰(distrorted peak)：形状不对称的色谱峰， 前伸峰、拖尾峰都属于这类。

　12、反峰(negative peak)：也称倒峰、负峰，即出峰的方向与通常的方向相反的色谱峰。

　13、原点(origin)：纸或薄层板上滴加试样部位的中心点

　14、斑点(spot)：平面色谱法中，组分在展开和显谱后呈现近似圆形或椭圆形的色区

　15、区带(zone)：在色谱柱、纸或薄层板上被分离组分所占的区域。

　16、复斑(multiple spot)：一种组分展开后形成两个或多个清晰斑点。

　17、区带拖尾(zone tailing)：由于物理、化学等作用的影响，一种组分在展开后形成的彗星形状斑点。

　18、基线(base line)：在正常操作条件下，仅有流动相通过检测器系统时所产生的响应信号曲线。

　19、基线漂移(baseline drift)：基线随时间定向的缓慢变化。

　20、基线噪声(N　，baseline noise)：由于各种原因而引起的基线波动。

　21、统计矩(moment)：色谱流出曲线是组分在检测器中浓度或质量依时间的统计分布曲线，响应值对应于分布密度。组分在柱内迁移时间　r　次幂的数学期望称为流出曲线的　r　阶原点矩。而组分在柱内迁移时间与平均迁移时间差的　r　次幂的数学期望称为流出曲线的　r　阶中点矩。

　22、一阶原点矩(first origin moment)：组分在柱内迁移时间的数学期望。当流出曲线为对称峰时，即为组分的保留时间。

　23、二阶中心矩( ?2 ，second central moment)：二阶中心矩为流出曲线的方差。定义为：?2=E(t-Et)2 式中，E代表平均。

　24、三阶中心矩(?3 ，third central moment)：定义为：?3=E(t-Et)3

　可以表示流出曲线的不对称程度。峰形对称时?3=0，前伸峰?30.

　第二部分　分离模式

　1、液相色谱法(liquid chromatography ，LC)：用液体作流动相的色谱法。

　2、液液色谱法(liquid liquid chromatography，LLC )：将固定液涂渍在载体上作为固定相的液相色谱法。

　3、液固色谱法(liquid solid chromatography，LSC )：用固体(一般指吸附剂)作为流动相的液相色谱法。

　4、正相液相色谱法(normal phase liquid chromatography ，NPLC)：固定相的极性较流动相的极性强的液相色谱法。

　5、反相液相色谱法(reversed phase liquid chromatography，RPLC )：固定相的极性较流动相的极性弱的液相色谱法。

　6、柱液相色谱法(liquid column chromatography )：在柱管内进行组分分离的液相色谱法。

　7、高效液相色谱法(high performance liquid chromatography，HPLC )：具有高分离效能的柱液相色谱法。

　8、尺寸排除色谱法(size exclusion chromatography，SEC )：用化学惰性的多孔性物质作为固定相，试样组分按分子体积(严格来讲是流体力学体积)进行分离的液相色谱法。

　9、凝胶过滤色谱法：(gel filtration chromatography )：水或水溶液作为流动相的体积排除色谱法。

　10、凝胶渗透色谱法：(gel permeation chromatography ，GPC)：有机溶剂作为流动相的体积排除色谱法。

　11、亲和色谱法(affinity chromatography )：用连接在基体上的配位体做固定相，使其与蛋白质或其他大分子发生可逆的高选择性的相互作用，利用不同亲和力进行分离的液相色谱法。

　12、离子交换色谱法(ion exchange chromatography ，IEC)：以离子交换作用分离离子型化合物的液相色谱法。

　13、离子色谱法(ion chromatography )：以含有某种特定离子的水溶液作为流动相，流出液通过抑制柱(或不通过抑制柱)，在降低流动相背景信号的条件下用于分离离子的液相色谱法。

　14、离子抑制色谱法(ion suppression chromatography )：通过调节流动相的PH值来抑制试样组分的电离，以分离离子型化合物的液相色谱法。

　15、离子对色谱法(ion pair chromatography )：用形成离子对化合物进行分离的液相色谱法。16、疏水作用色谱法(hydrophobic interation chromatography )：用适度疏水性的固定相，以含盐的水溶液作为流动相，借疏水作用分离生物大分子化合物的液相色谱法。

　17、制备液相色谱法(preparative liquid chromatography)：用能处理较大量试样的色谱系统，进行分离、切割和收集组分，以提纯化合物的液相色谱法。

　18、平面色谱法(planar chronatography)：在平面介质上进行组分分离的色谱法，也叫平板色谱法。

　第三部分 ?常用术语

　M：分子量

　MC：二氯甲烷(methylene chloride)

　MeOH：甲醇(methanol)

　MS：质谱

　h：峰高

　HPLC：高效液相色谱

　ID：内径，dC

　A：吸收度(式3.1，3.2);也作面积

　ACN：乙腈(acetonitrile)

　B(%B)：二元流动相中的强溶剂(% v/v)

　C8，C18：烷基键合相的键长度(八烷基或十八烷基)

　CD：环糊精(cyclodextrin)

　CV：变异系数(通常以%表示);式15.3

　dC：色谱柱内径(cm)

　dP：颗粒直径(?m)

　DAD：二极管阵列检测器

　EC：电化学(检测器)

　F：流速(ml/min)

　FL：荧光(检测器)

　GS：梯度斜度参数(式8.2a);k*=20/GS

　IEC：离子交换色谱(ion-exchange chromatography)

　IPC：离子对色谱 (ion-paire chromatography)

　k：保留因子(式2.4)

　k*：梯度洗脱中，k的有效值或平均值(式8.1)

　ka，kZ：色谱图中，首峰(a)和末峰(z)的k值

　L：色谱柱长度(cm)

　LC-MS：液相色谱-质谱

　MTBE：甲基-叔-丁醚(methyl-t-butyl ether)

　N：色谱柱塔板数(式2.82.8b)

　N：噪音(式3.3，图3.3)

　NARP：非水反相HPLC

　NPC：正相色谱

　P：色谱柱压力降(通常以psi表示)(式2.9)

　pKa：酸或供质子碱的酸性常数

　PAH：多环芳烃(polyaromatic hydrocarbon)

　RS：分离度(式2.1)

　RI：折光指数

　RPC：反相色谱

　S：信号;式3.3;图3.3;以及由式6.1定义的参数

　tD：延迟或滞留时间(min，用于梯度洗脱中);等于VD/F

　tG：梯度时间(min)

　tR：保留时间(min)(图2.2);等于tO(1+k)

　tRa，tRz：色谱图中首峰(a)与末峰(z)的保留时间，tR(min)(图8.6a)

　tO：色谱柱死时间(min)(式2.5)

　t1，t2：相邻谱峰1与谱峰2的保留时间(min)

　TEA：三乙胺(triethylamine)

　THF：四氢呋喃(tetrahydrofuran)

　UV：紫外光谱

　VD：延迟或滞留体积(mL);为梯度混合器与色谱柱人口之间的体积(包括混合器的体积)

　Vm：色谱柱死体积(mL)(式2.6);Vm为色谱柱内部的流动相体积，不包括附于固定相上的溶剂

　Vmax：最大样品体积(mL)(式13.1)

　Va：样品体积(mL)

　w：重量(mg);也作半峰高处的峰宽(min)

　wmax：不超载色谱柱的最大进样量(mg)(式2.17)

　wS：色谱柱的饱和容量(mg)(式13.4)

　W：峰底宽(min)(图2.2)

　Wth：大进样量对峰底宽的贡献(min)(式13.2)

　WO：小进样量的峰底宽(min)

　W1/2：半峰高处的峰宽(min)(图1.1)

　a：分离因子，等于k2/k1，其中k2与k1分别为相邻谱峰2和谱峰1的k值

　△tR：tRz-tR(min)

　△%B：梯度洗脱期间，%B的变化

　?：摩尔吸收系数

　?o：正相HPLC 中溶剂或溶剂混合液的强度

　?：粘度(CP)

　A，B，C：式2.11中的常数;数值A，B与C随k值而变化，但改变 其它 条件或溶质时基本不变

　A，B，C：式2.10中的常数;数值A，B与C随条件和样品而变化

　A，B，C：式2.10a中的常数;数值A，B与C随条件和样品而变化

　C：谱峰最大值处的浓度(mol/L)

　CO：注入样品中溶质的浓度(mol/L)

　GI：化学电离(MS)

　DGA：N，N-二甲基-1-萘酰胺;(也作二甲基苯胺dimethylaniline)

　EI：电子电离(MS)

　ELS：蒸发光散 射击 (Evaporative light scattering)

　EtOAc：乙酸乙酯(ethyl acetate)

　FAB：快速原子轰击(MS)

　FD：场解吸附(MS)

　h：折合板高，等于H/dP(式2.11)

　HB：羟基苯甲酸(hydrxybenzoic acid)(图7.8，7.17与7.19)

　HFBA：七氟丁酸(hyptafluorobutyric acid)

　IPA：异丙醇(isopropanol)

　kW：以水作为流动相的k值(式6.1)

　LCEC：液相色谱电化学检测器

　LD：激光解吸(MS)

　LSIMS：液态二级离子质谱

　MALDI：基质辅助激光解吸电离

　MP：对羟苯甲酸甲酯

　[P-]m：流动相中离子对试剂P-的浓度(mmol/L)

　PAD：脉冲电流分析检测器

　PBP：极性键合相

　PD：等离子解吸(MS)

　PP：对羟苯甲酸丙酯

　PTH：乙内酰苯硫脲

　R+，R-：分别为阴离子与阳离子离子交换色谱柱中的荷电功能基困(式7.4和7.5[如-N(CH3)3+和-SO3-]

　RF：响应因子

　TBA+：四丁基铵离子

　tBME：见MTBE

　TMS：三甲基硅烷(trimethylsilyl;也为C1)

　TNB：1，3，5-三硝基苯(1，3，5-trinitrobenzene)

　TOF MS：时间飞行质谱

　TSP：热喷雾(MS)

　u：流动相通过色谱柱的速度(cm/s);等于L/to

　V：峰底宽(mL)

　Vc：色谱柱内峰展宽对V的贡献;也作小样品量峰底宽(mL)(式2.16)

　VR：保留体积(mL)

　W：峰宽(min)(式2.12)

　Wc，WS，：分别为色谱柱，进样器，连续管和流通池对W的贡献(min)

　Wlc，Wfc：(式2.12)

　X，X1，：无特征结构的溶质(图7.8，7.17和7.19)

　X2，X3

　XB：流动相中的B溶剂的摩尔分数

　V：折合速度，等于udp/Dm(式2.11)

　б：高斯曲线的标准偏差;等于峰底的1/4

　?：检测器响应时间常数(S)

　?：流动相中B溶剂的体积分数;等于0.0

GC ：Gas Chromatography 气相色谱法 用气体作为移动相的色谱法。根据所用固定相的不同可分为两类：固定相是固体的，称为气固色谱法；固定相是液体的则称为气液色谱法 气相色谱系统由盛在管柱内的吸附剂或惰性固体上涂着液体的固定相和不断通过管柱的气体的流动相组成。将欲分离、分析的样品从管柱一端加入后，由于固定相对样品中各组分吸附或溶解能力不同，即各组分在固定相和流动相之间的分配系数有差别，当组分在两相中反复多次进行分配并随移动相向前移动时，各组分沿管柱运动的速度就不同，分配系数小的组分被固定相滞留的时间短，能较快地从色谱柱末端流出

GC-MS是气相色谱和质谱联用，GC分离，MS检测;GPC是凝胶渗透色谱，LC分离，一般情况是UV检测。前者是GC，后者是LC。

其次GC-MS是用MS检测分子离子峰，从而推断分子量；GPC是做大分子物质的，比如蛋白质、多肽，是根据分子量和空间几何形状来分离的（先大后小），得到的是一个顺序（从大到小），或一个范围（要加Mark）

质谱仪的联用技术

质谱仪可以与其他仪器联用，如气相色谱-质谱联用（GC/MS）、

高效液相色谱-质谱联用（HPLC/MS）；也可以质谱-质谱联用（MS-MS）。

（1） GC/MS、HPLC/MS 仪：

基于色谱和质谱的仪器灵敏度相当，加之使分离效果好的色谱成

为质谱的进样器，而速度快、分离好、应用广的质谱仪作为色谱的鉴

定器，使它们成为目前最好的用于分析微量的有机混合物的仪器。

（2）液质联用与气质联用的区别:

气质联用仪(GC-MS)是最早商品化的联用仪器，适宜分析小分

子、易挥发、热稳定、能气化的化合物；用电子轰击方式（EI）

得到的谱图，可与标准谱库对比。

液质联用(LC-MS)主要可解决如下几方面的问题：不挥发性化合

物分析测定；极性化合物的分析测定；热不稳定化合物的分析

测定；大分子量化合物（包括蛋白、多肽、多聚物等）的分析

测定；一般没有商品化的谱库可对比查询，只能自己建库或自

己解析谱图。 所以目前液质联用在环境领域主要应用于有标准

物质参照情况下的定性分析。

电感耦合等离子体质谱ICP-MS 所用电离源是感应耦合等离子体（ICP），它与原子发射光谱仪所用的ICP是一样的，其主体是一个由三层石英套管组成的炬管，炬管上端绕有负载线圈，三层管从里到外分别通载气，辅助气和冷却气，负载线圈由高频电源耦合供电，产生垂直于线圈平面的磁场。如果通过高频装置使氩气电离，则氩离子和电子在电磁场作用下又会与其它氩原子碰撞产生更多的离子和电子，形成涡流。强大的电流产生高温，瞬间使氩气形成温度可达10000k的等离子焰炬。样品由载气带入等离子体焰炬会发生蒸发、分解、激发和电离，辅助气用来维持等离子体，需要量大约为1L/min。冷却气以切线方向引入外管，产生螺旋形气流，使负载线圈处外管的内壁得到冷却，冷却气流量为10-15L/min

IR，红外光谱

当一束具有连续波长的红外光通过物质，物质分子中某个基团的振动频率或转动频率和红外光的频率一样时，分子就吸收能量由原来的基态振(转)动能级跃迁到能量较高的振(转)动能级，分子吸收红外辐射后发生振动和转动能级的跃迁，该处波长的光就被物质吸收。所以，红外 红外光谱

光谱法实质上是一种根据分子内部原子间的相对振动和分子转动等信息来确定物质分子结构和鉴别化合物的分析方法

应用： 红外光谱对样品的适用性相当广泛，固态、液态或气态样品都能应用，无机、有机、高分子化合物都可检测。此外，红外光谱还具有测试迅速，操作方便，重复性好，灵敏度高，试样用量少，仪器结构简单等特点，因此，它已成为现代结构化学和分析化学最常用和不可缺少的工具。红外光谱在高聚物的构型、构象、力学性质的研究以及物理、天文、气象、遥感、生物、医学等领域也有广泛的应用。

红外吸收峰的位置与强度反映了分子结构上的特点，可以用来鉴别未知 液态水的红外光谱物的结构组成或确定其化学基团；而吸收谱带的吸收强度与化学基团的含量有关，可用于进行定量分析和纯度鉴定。另外，在化学反应的机理研究上，红外光谱也发挥了一定的作用。但其应用最广的还是未知化合物的结构鉴定

UV，紫外光谱：配合物组成及其稳定常数的测定 定量分析结构分析定性分析应用范围定义紫外光谱是分子中某些价电子吸收了一定波长的电磁波,由低能级跃近到高能级而产生的一种光谱

当分子中的电子吸收能量后会从基态跃迁到激发态，然后放出能量（辐射出特征谱线）。回到基态 而辐射出特征普线的波长在紫外区中就叫做紫外光谱

定性分析

在有机化合物的定性分析中，紫外－可见光谱适用于不饱和有机化合物，尤其是共轭体系的鉴定，以此推断未知物的骨架结构。此外，可配合红外光谱、核磁共振波谱法和质谱法进行定性鉴定和结构分析，因此它仍不失为是一种有用的辅助方法。一般有两种定性分析方法，比较吸收光谱曲线和用经验规则计算最大吸收波长λmax，然后与实测值进行比较。

结构分析

结构分析可用来确定化合物的构型和构象。如辨别顺反异构体和互变异构体。

定量分析

紫外－可见分光光度定量分析的依据是Lambert-Beer定律，即在一定波长处被测定物质的吸光度与它的溶度呈线性关系。应此，通过测定溶液对一定波长入射光的吸光度可求出该物质在溶液中的浓度和含量。种常用的测定方法有：单组分定量法、多组分定量法、双波长法、示差分光光度法和导数光谱法等。

配合物组成及其稳定常数的测定

测量配合物组成的常用方法有两种：摩尔比法（又称饱和法）和等摩尔连续变化法（又称Job法）。

酸碱离解常数的测定

光度法是测定分析化学中应用的指示剂或显色剂离解常数的常用方法，该法特别适用于溶解度较小的弱酸或弱碱。

NMR，核磁共振波谱

核磁共振波谱分析法(NMR)是分析分子内各官能团如何连接的确切结构的强有力的工具。 磁场中所处的不同能量状态（磁能级）。原子核由质子、中子组成，它们也具有自旋现象。描述核自旋运动特性的是核自旋量子数I。不同的核在一个外加的高场强的静磁场（现代NMR仪器由充电的螺旋超导体产生）中将分裂成2I＋1个核自旋能级（核磁能级），其能量间隔为ΔE。对于指定的核素再施加一频率为ν的属于射频区的无线电短波，其辐射能量hν恰好与该核的磁能级间隔ΔE相等时，核体系将吸收辐射而产生能级跃迁，这就是核磁共振现象。

核磁谱在蛋白质研究上的应用

利用核磁谱研究蛋白质，已经成为结构生物学领域的一项重要技术手段。X射线单晶衍射和核磁都可获得高分辨率的蛋白质三维结构，不过核磁常局限于35kDa以下的小分子蛋白，尽管随着技术的进步，稍大的蛋白质结构也可以被核磁解析出来。另外，获得本质上非结构化（Intrinsically Unstructured）的蛋白质的高分辨率信息，通常只有核磁能够做到。 蛋白质分子量大，结构复杂，一维核磁谱常显得重叠拥挤而无法进行解析，使用二维，三维甚至四维核磁谱，并采用13C和15N标记可以简化解析过程。另外，NOESY是最重要的蛋白质结构解析方法之一，人们通过NOESY获得蛋白质分子内官能团间距，之后通过电脑模拟得到分子的三维结构。

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