简述激光共焦扫描显微镜与普通光学显微镜成像方式的区别和优缺点
一、普通生物显微镜由3部分构成,即:①照明系统,包括光源和聚光器;②光学放大系统,由物镜和目镜组成,是显微镜的主体,为了消除球差和色差,目镜和物镜都由复杂的透镜组构成;③机械装置,用于固定材料和观察方便。优点:操作简便,制样方便。
二、激光共聚焦扫描显微镜,用激光作扫描光源,逐点、逐行、逐面快速扫描成像,扫描的激光与荧光收集共用一个物镜,物镜扫描激光的聚焦点,也是瞬时成像的物点。由于激光束的波长较短,光束很细,所以共焦激光扫描显微镜有较高的分辨力,大约是普通光学显微镜的3倍。系统经一次调焦,扫描限制在样品的一个平面内。调焦深度不一样时,就可以获得样品不同深度层次的连续图像,这些图像信息都储于计算机内,通过计算机分析和模拟,就能显示细胞样品的立体结构,实现三维成像与解析,获得精细的细胞骨架、染色体、细胞器和细胞膜系统的三维图像。优点:分辨率高于普通光学显微镜;能对样品进行连续无损光学切片,并去除了杂散光的影响,增加了图像的清晰度。
光电成像技术:
光学系统由一系列折射和反射面组成(通常是球面,也有平面和非球面),若它们的曲率中心在同一条直线上,则该光学系统称为共轴光学系统(symmetrical optical system),这条直线称为光轴(optical axis).
以下图所示的光学系统为例.
它表示的是点 ?发出一束光束经过光学系统后会聚到 ?点.
称A点为物点(object point),称 ?点为像点(image point).
若物、像是由实际光线指出或被指,则它们是实物(real object)和实像(real image).
若物、像是由实际光线的延长线相交所指的,则它们是虚物(virtual object)和虚像(virtual image).
物所在的空间称为物空间(object space),像所在的空间称为像空间(image space).
点物所发的光是发散的同心光束,相当于发散的球面波,若它经过光学系统后,形成会聚的同心光束,即会聚的球面波,那么会聚的这个像点称为完善像点(perfect image).
应注意:
虚物是为描述和研究方便才定义的,它是由前面的光学系统给出的,不是任意设定的.
虚像不能被屏幕接收,但可以被人眼感受.而实像可以被屏幕接收.
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