过表达小鼠和cre小鼠什么情况下交配不到一起?
除非性别相同,不然都能交配到一起。
本文通过同源重组,构建了表达AVP,VIP,PROK2神经多肽的iCre(improved Cre,优化的Cre重组酶)BAC载体。通过受精卵原核注射,得到了在SCN特异性神经元表达iCre重组酶的转基因小鼠,它们分别是AVP-iCre,VIP- iCre,PROK2- iCre。然后对转基因小鼠进行基因型以及拷贝数鉴定,并将其阳性小鼠与Rosa26-mT/mG报告小鼠交配,对得到的双阳性小鼠进行SCN切片。
进一步通过观察绿色荧光蛋白的分布与SCN特异神经元的分布,判断这些iCre转基因小鼠表达的CRE的组织特异性和活性。同时在没有外在光暗周期的环境中测量这些转基因小鼠的生物节律情况,排除它们的生物节律被损坏了,结果发现iCre转基因小鼠与野生型小鼠的生物节律没有区别,AVP-iCre,VIP-iCre和PROK2-iCre小鼠可以用来研究生物节律。因此本文成功构建了三个iCre转基因工具小鼠。
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