福林酚比色法原理

原理蛋白质与福林(Folin)-酚试剂反应，产生蓝色复合物。作用机理主要是蛋白质中的肽键与碱性铜盐产生双缩脲反应，同时也由于蛋白质中存在的酪氨酸与色氨酸同磷钼酸-磷钨酸试剂反应产生颜色。呈色强度与蛋白质含量成正比，是检测可溶性蛋白质含量最灵敏的经典方法之一。

此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Folin—酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这个方法的优点是灵敏度高，比双缩脲法灵敏得多，缺点是费时较长，要严格控制操作时间，标准曲线也不是严格的直线形式，且专一性较差，干扰物质较多。

福林酚比色法注意事项

(1) Folin-酚乙试剂在酸性条件下较稳定，而Folin－酚甲试剂是在碱性条件下与蛋白质作用生成碱性的铜－蛋白质溶液。当Folin－酚乙试剂加入后，应迅速摇匀（加一管摇一管），使还原反应产生在磷钼酸－磷钨酸试剂被破坏之前。

(2) 血清稀释的倍数应使蛋白质含量在标准曲线范围之内，若超过此范围则需将血清酌情稀释。

福林酚法测蛋白为什么比双缩脲法灵敏？

用于蛋白质含量的测定，蛋白的颜色反应，浓度的测定.

蛋白质分子中有含酚基的氨基酸(如酪氨酸、色氨酸等)与福林酚反应，生成深蓝色复合物，蓝色的深浅与蛋白质含量成正比。

常用分子生物学试剂。

F8010 Folin-Phenol 福林酚 Folin & Ciocalteu’s phenol reagent

suitable for determination of total protein by Lowry method, 2 N

Descriptions

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Properties

concentration 2 N

suitability suitable for determination of total protein by Lowry method

福林-酚法是双缩脲法的发展，包括两步反应：

(1)在碱性条件下，蛋白质与铜作用生成蛋白质—铜络合物。

(2)此络合物将试剂磷钼酸—磷钨酸(FolIn试剂)还原，混合物深蓝色(磷钼蓝和磷钨蓝混合物)，颜色深浅与蛋白质含量成正比。

此方法操作简便，灵敏度比双缩脲法高100倍，定量范围为5～100μg蛋白质。FolIn试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸引起，因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物，均有干扰作用。此方法的缺点是有蛋白质的特异性影响，即不同蛋白质因络氨酸、色氨酸含量的不同而使显色强度稍有不同，标准曲线也不是严格的直线形式。

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