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用PAGE胶跑DNA

梵高1年前 (2023-12-23)阅读数 6#综合百科
文章标签丙烯酰胺的话

首先原理差不多,具体细节差异还是有的。

跑DNA的话,可以参见 人家做AFLP的protocol,当然也要看你想分离的片断大小咯。

两者都要用到丙烯酰胺、甲叉丙烯酰胺、TEMED、APS(10%)

但是跑DNA一般用 TBE(Tris 、硼酸、EDTA),还含尿素

用PAGE胶跑DNA

用于western的蛋白胶多用 Tris-HCl,SDS buffer。蛋白较一般有分离胶和浓缩胶。

浓度看分离的东西;上样量的话其实没法比较,染色的方法不一样,DNA银染的话少上点,具体多少我也记不清了,自己查一下吧;如果说是上样体积,看你的梳子大小咯

电压:AFLP要求DNA要预电泳,冲洗掉尿素后再插梳子,60W 2h;当二甲苯青跑到底部约1/3处终止电泳。

DNA的loading buffer含染料 溴酚蓝、二甲苯青等来指示跑到哪里呢。

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