marker和ladder有什么区别
marker
[英][?mɑ:k?(r)][美][?mɑ:rk?(r)]
n.标识,标记; 记号笔,阅卷人; 防守队员; 特征;
ladder
[英][?l?d?(r)][美][?l?d?]
n.梯子,阶梯; 梯状物; 途径; (紧身裤袜或长筒袜的)滑丝;
vi.使(袜子)发生抽丝现象; 像长筒袜一样抽丝;
看到你的目的蛋白条带在30和35kd之间,就可以初步断定是你的目的蛋白。2.
内参呢,内参也叫看家基因,在组织或细胞中都会表达,且表达量在不同组织或细胞中几乎是相同的,一般有β-actin,gapdh等。其作用有二,1.
是看提取蛋白质量的好坏。如果做western的时候,内参照蛋白有条带,而目的蛋白没有,说明蛋白的提取和转膜等步骤没有问题,是目的蛋白的抗体质量不好或者是稀释倍数不对。2.
是比较客观的说明目的蛋白的表达情况,消除上样量等的误差。不同的标本之间由于蛋白提取的量有差别,可能强阳性的表达跑出来的带很弱。因此设立内参照,比较不同标本之间的表达情况。3.
最好测一下蛋白浓度再上样,这样好点。当然也看你的实验室是定性还是定量了,定性的话,我觉得可以不用测浓度;要是准备定量,还是尽量保证上样量一致吧。
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