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pcr核酸检测是什么意思?方法和步骤

小肉包1年前 (2023-12-02)阅读数 9#综合百科
文章标签核酸阴性

核酸检测是确定世界上是否存在新冠肺炎的有效方法。目前,人们主要使用鼻拭子、咽拭子和抗体血清lgm作为参考。但是根据最新的新加坡入境要求,需要进行pcr核酸检测,那么pcr核酸检测是什么意思呢?

pcr核酸检测是什么意思

PCR是指聚合酶链式反应,可以用来扩增DNA,从而将少量的DNA扩增到可以检测的程度。有些病毒的核酸是DNA,所以检测需要这种方法。所以PCR不是一种检查,而是一种检测DNA的方法。例如,这种方法用于定量乙型肝炎病毒DNA。DNA检查的目的一方面是为了诊断疾病,如果连病原体的DNA都能检测到,就说明病原体被感染了;另一方面是判断病毒复制多少,从而判断疾病的严重程度或治疗效果。

pcr核酸检测方法与步骤

核酸检测需要经过取样、留样、留样、核酸提取、计算机检测五个步骤。

核酸检测的第一步是采集人体分泌物,用鼻或咽拭子擦拭鼻腔或咽后壁及双侧咽扁桃体。

第二步:医护人员留样,将测试头浸入细胞保存液中,断尾后立即旋紧管盖。

第三部分是将样品放入密封袋中,妥善保管,及时送检。

第四步,把样本送到实验室,提取核酸。

第五步,对提取液进行荧光PCR扩增反应。

核酸是什么

核酸是一种由核苷酸组成的生物大分子,可分为核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)两大类,其中RNA多为单链,DNA多为双链。除了朊病毒,核酸是生命所必需的生物大分子,主要功能是构成生命体的遗传信息载体。此外,一些核酸可以作为并参与生物活性酶分子或其他分子机器的形成。

核酸检测是什么

核酸检测,顾名思义就是对核酸的检测。

核酸检测有什么独特的优势?为什么可以作为诊断新冠肺炎的“金标准”?

其实每种检测方法都有自己的应用场景。以病毒检测为例,常见免疫学检测方法(胶体金、ELISA、化学发光等)的检测对象。)是病毒抗原或抗体,相当于“轮廓描述”。由于从感染到检测有一个时间窗,免疫学检测方法一般不适合早期诊断。

:假阳性与假阴性

1.假阳性

假阳性通常很少见。一般实验室工作人员操作不当会导致样本间交叉污染或扩增产物残留污染,可能导致假阳性。

但通过严格控制检测过程,实施多个阴性样本随机参与检测的策略,可以有效避免假阳性。

2.假阴性

这里需要说明的是,PCR检测的假阴性和临床假阴性其实不是同一个概念。

以网上热议的新冠肺炎的诊断为例,临床假阴性是指临床症状和影像学高度怀疑被感染,但PCR检测多次或一直为阴性的情况;PCR检测的假阴性是指采集的样本中有足够量的新型冠状病毒,但没有检测出来。

要避免核酸检测的假阴性,主要需要解决以下三个问题:(1)感染细胞中有足够的病毒,(2)样品中能收集到含病毒的细胞,(3)能检测到样品中的病毒。

PCR试剂盒的技术参数主要影响第三步检测。

仅针对第三检测步骤,如果样本中的病毒数量低于一定水平(低于最低检测限),PCR试剂盒无法检测到。由此看来,PCR检测的假阴性是不能完全避免的。这也是为什么需要补充发展病毒特异性抗体检测的原因。

沈阳PCR核酸检测实验室

pcr核酸检测是什么意思?方法和步骤

实验室建设坚持高标准、严要求,严格按照国家《医学生物安全二级实验室建筑技术标准》进行建设。建筑面积100多平方米,分为试剂储存和制备区、标本制备和提取区、扩增和产物分析区三个区域。实验室配有自动核酸提取器、实时荧光定量PCR仪、放大器、高压灭菌器、B2生物安全柜、洁净工作台、超低温冰箱等仪器。消毒防护设施齐全,符合相关生物实验室安全标准。为了防止实验室外的区域被污染,实验室内的气压为负压,有效降低了感染的风险。此外,实验室配有污水处理系统,实现了废液的合理排放和处理。

*目前中国很多地区都建有PCR核酸检测实验室,在新冠肺炎检测核酸。

定量PCR应用于核酸扩增,检测模板核酸的含量。

WB一般是用来做蛋白定性的,或者可以做半定量。

ELISA一般用来做定量,可以读取数值。检测什么抗原抗体之类的,就常用ELISA。它在原理上和WB基本一致。都是抗原抗体反应。

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