实时荧光定量PCR仪与基因扩增仪的区别到底是什么呢?
荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,实时荧光定量PCR仪主要是用来定量分析和确定基因转录水平的,而普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段,定量PCR仪可以做普通PCR仪的工作,而反之就不行了,况且这样代价太大了,一般的实验室都不允许这样做的。总之两者的功能不能互相取代。 普通的基因扩增仪(PCR仪)只能够定性地分析是否存在目标片段。但是价格要低很多,而且运行成本也要低很多。不过不能直接得到扩增结果,还需要做电泳检测。实际中检测遗传疾病,品种分子标记筛选,甚至亲自鉴定等都可以由普通PCR仪完成。但是,某些需要定量的实验就必须用到实时定量PCR了。比如检测某些病原物的数量(血液乙肝病毒复制程度),特定基因的表达量(比如结合反转录做的RNA定量分析),某些基因在染色体组中拷贝数(以前往往使用southern blot技术)等等。
用我自己的话说,就是PCR扩增仪是普通的PCR反应,反应后产物一般通过电泳查看结果。实时荧光PCR即real-time
PCR,是在反应体系中加入目的基因的探针,PCR过程中,根据目标基因的表达量多少,探针可发荧光,RT-PCR仪通过检测荧光表达量来记录基因表达量,从而达到了同不定量检测基因表达量,不需要电泳辅助。
如果一步PCR反应即可达到目标就直接用实时荧光PCR即可快速检测,如果你的PCR反应需要两步(如巢式PCR),第一步可以用普通PCR扩增仪,当然第一步也可以用实时荧光PCR,不放探针就行了,你不觉得这有点奢侈吗......
价格,那得看哪产的了......一部进口的普通PCR可以比国产的RT-PCR贵很多。仪器也需要休息,我学校的一台普通扩增仪几乎一天用20个小时,到最后每天都会出问题,你舍得用进口的RT-PCR干这个嘛?PCR一页可以说一分钱一分货,举一个例子,进口的PCR有的可以将温度精确到0.1度,而且变温速度也很重要,关键是看你做的实验是否需要这么精确,是否需要进口高端级别的PCR
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